《實驗動物學在科研、臨床和轉化醫(yī)學中的應用》

實驗動物病理技術培訓項目

新一代單細胞水平原位定量雜交技術及應用培訓班

2016年7月9日-10日

北京中國科學院生物物理研究所

【課程背景】

近年來轉錄組分析在癌癥研究的廣泛使用已證明，RNA 與蛋白質一樣可以作為具有臨床診斷，評估以及治療預后展望價值的生物指標。盡管這種轉錄組分析可以找到許多潛在的生物標記物，將這些發(fā)現(xiàn)轉化為臨床檢測常規(guī)使用的RNA 生物標記物則面臨諸多技術方面的挑戰(zhàn)。雖然單個細胞原位檢測和可視化DNA 和蛋白質很普遍，直到目前為止RNA 分析最好的常規(guī)檢測手段仍停留在液態(tài)檢測并量化RNA。這些方法只能提供測量細胞群的一個“平均數(shù)”，掩蓋了RNA 表達在細胞之間驚人的變異程度。由于其在生理功能中的特殊作用，蛋白質一直作為普遍使用的生物標記物為疾病治療提供檢測依據(jù)，同時也使得它的檢測技術得以完善。由于缺乏有效的RNA 原位檢測方法往往導致使用DNA 和蛋白質作為替代物來檢測那些最初發(fā)現(xiàn)的RNA 生物標記物，然而這種做法存在問題。RNA 表達的變化可能不是源于DNA 改變，也不一定與蛋白質水平相同——或者可能沒有相應的蛋白相對應，例如非編碼RNA?？傊?，利用基因芯片或RNA-seq發(fā)現(xiàn)的RNA 作為生物標記物時，最好的方法是直接原位檢測RNA；因為使用DNA 或蛋白質替代，或基于溶液的RNA 分析，不可避免地將導致信息丟失，使RNA 生物標記物的整體診斷效用大打折扣。

本次高級研修班旨在學習和使用新一代單細胞水平RNAscope原位定量可視化技術，為生命科學研究領域的老師和同學們提供一次高水準的分子病理學專業(yè)培訓。培訓內容涵蓋了從傳統(tǒng)原位雜交的發(fā)展介紹到新一代單細胞水平RNA原位定量可視化技術的出現(xiàn)；聘請專家對使用RNAscope技術研究腫瘤、感染性疾病等的分子病理機制方面進行專題講座和學術交流；對多色化學及熒光原位定量雜交技術原理、圖像采集、數(shù)據(jù)分析等進行專題技術講解；并設置了完整的RNAscope技術現(xiàn)場教學實踐。采用理論、技術再到科研中的具體應用相結合的方式，系統(tǒng)、詳細的介紹RNAscope單細胞水平原位定量雜交的原理、具體方法等；通過現(xiàn)場原位雜交實驗及圖像采集分析等教學，使大家真正做到知其然且知其所以然，充分理解并掌握相關技術。

【專家介紹】

蔡車國博士

中國科學院上海生命科學研究院生物化學與細胞生物學研究所

2010 年至 2011 年于美國杜蘭大學從事博士后研究工作，研究方向為抗腫瘤多肽合成藥物的篩選與機制研究。2012 年于中國科學院上海生命科學研究院生物化學與細胞生物學研究所先后從事博士后和副研究員工作。期間一直從事乳腺干細胞與乳腺發(fā)育方面的工作，在微環(huán)境因子調控乳腺干細胞干性維持的研究中鑒定出一個新的影響乳腺干細胞自我更新的Wnt信號通路因子 Rspo1，發(fā)表在學術期刊 Genes Dev。在對乳腺干細胞重要特征基因的鑒定中與他人合作鑒定出乳腺干細胞的表面分子標記Procr，發(fā)表在學術期刊Nature。在細胞周期蛋白調控乳腺干細胞與乳腺發(fā)育中的作用研究中與他人合作鑒定了細胞周期蛋白CCNY 和 CCNYL1 在乳腺干細胞和乳腺發(fā)育中的作用，發(fā)表在學術期刊PLoS Genetics。主持國家博士后基金，國家自然科學基金委青年科學基金，國家自然科學基金委面上基金，并以主要負責人參與了中國科學院干細胞先導項目，重大專項項目，國家 973 項目等多個項目；并為國際干細胞協(xié)會 ISSCR 會員，Journal of stem cell biology, Research & Therapy 學術期刊編委。

報告內容：

介紹影響乳腺干細胞自我更新的微環(huán)境因子的發(fā)現(xiàn)和細胞周期蛋白在調控乳腺干細胞自我更新中的作用機制。以及RNAscope技術在干細胞生物學研究中的應用和優(yōu)勢。

宋寧博士

上海交通大學醫(yī)學院上海市生殖醫(yī)學重點實驗室

上海市青年東方學者，亞洲男科學協(xié)會青年委員。從事生殖系統(tǒng)功能及形態(tài)學研究，綜合利用形態(tài)學、生物信息學、分子生物學等研究方法重點研究精子發(fā)生過程中的組蛋白修飾、lncRNAs功能研究、染色質重塑等表觀遺傳學調控機制。發(fā)表SCI論文5篇，單篇被引次數(shù)46次，授權發(fā)明專利1項。第14屆國際組織細胞化學會“Young Scientist Best Poster Award”。主持國家自然科學基金1項，上海市課題3項。

報告內容：

原位雜交（ISH）技術是在組織切片上檢測并觀察特定RNA／DNA分布情況的重要形態(tài)學方法。在傳統(tǒng)ISH技術的使用過程中，成功的實驗操作和結果的評價主要依賴于“熟練”與“必要的對照實驗”?；谖覀兌嗄甑膶嶋H操作經(jīng)驗，本次分享中，介紹ISH的實驗準備過程、實驗材料的選擇與固定方案、RNA保存狀態(tài)的評價方法、切片時的注意事項。簡述傳統(tǒng)ISH技術的探針設計方法和難點，重點介紹創(chuàng)新的RNAscope原位雜交技術的特點與優(yōu)勢，并結合實際研究課題展示其染色結果。

【課程安排】

【主辦單位】

中國科學院生物物理研究所

北京市實驗動物管理辦公室

北京市實驗動物行業(yè)協(xié)會

【協(xié)辦單位】

Advanced Cell Diagnostics

北京爾瑞醫(yī)療科技發(fā)展有限公司

【時間地點】

2016年7月9日-10日

中國科學院 生物物理研究所

地址：北京市朝陽區(qū)大屯路15號

【參加人員】

科研人員

【注冊費用】

本次培訓班免費

【參加人數(shù)】                 

第一天培訓講座，無人數(shù)限***。

第二天實驗操作，由于實驗室容量有限及試劑成本高昂，限20人參加。將根據(jù)報名情況，由主/協(xié)辦方篩選，并通知參加人員。

【說明】

培訓班提供午餐，晚餐及住宿自理。

授課期間發(fā)放教材。

參加實驗操作培訓的人員在培訓完畢后頒發(fā)結業(yè)******。

【報名聯(lián)系方式】

Email：ccpibp@126.com

聯(lián)系電話： 010-64888424

聯(lián)系人：郝俊峰

歡迎大家踴躍報名參加，現(xiàn)場有精美禮品哦！